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WB 化學(xué)發(fā)光成像儀操作步驟指南

閱讀：31發(fā)布時(shí)間：2025-4-13

WB 化學(xué)發(fā)光成像儀是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)里的得力助手，熟練掌握其操作步驟，能讓實(shí)驗(yàn)事半功倍。下面就為大家梳理WB 化學(xué)發(fā)光成像儀關(guān)鍵操作步驟流程：

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
儀器預(yù)熱：接通電源，打開(kāi)化學(xué)發(fā)光成像儀開(kāi)關(guān)，讓儀器預(yù)熱 15 - 30 分鐘。如同運(yùn)動(dòng)員上場(chǎng)前的熱身，預(yù)熱能使儀器達(dá)到穩(wěn)定工作狀態(tài)，保障檢測(cè)精度。
檢查環(huán)境：確保操作環(huán)境清潔、干燥，室溫維持在適宜范圍，通常是 20 - 25℃ 。過(guò)濕、過(guò)熱或過(guò)冷的環(huán)境，都可能器性能，影響成像效果。
準(zhǔn)備樣本：提前完成蛋白質(zhì)印跡（WB）實(shí)驗(yàn)，將含有目的蛋白的 PVDF 膜或 NC 膜，用鑷子小心取出，去除多余的緩沖液，保證膜表面潔凈，避免雜質(zhì)干擾后續(xù)成像。

樣本放置與參數(shù)設(shè)置
放置膜：打開(kāi)成像儀暗箱，將處理好的膜平整放置于成像平臺(tái)，注意避免膜出現(xiàn)褶皺，不然會(huì)致使成像不均。輕輕合上暗箱，確保密封嚴(yán)實(shí)，防止外界光線進(jìn)入。
參數(shù)設(shè)定：打開(kāi)操作軟件，依據(jù)實(shí)驗(yàn)需求與所使用的發(fā)光底物特性，調(diào)整曝光時(shí)間、靈敏度等關(guān)鍵參數(shù)。初次操作時(shí)，若拿捏不準(zhǔn)，可先嘗試較短曝光時(shí)間，后續(xù)按需增加，以防過(guò)度曝光讓圖像丟失細(xì)節(jié)。靈敏度設(shè)置要適配目標(biāo)蛋白的預(yù)估含量，含量低就調(diào)高些，反之亦然。

圖像采集與分析
采集圖像：點(diǎn)擊軟件中的 “開(kāi)始采集” 按鈕，成像儀即刻捕捉膜上的化學(xué)發(fā)光信號(hào)，并轉(zhuǎn)化成數(shù)字圖像顯示于屏幕。采集過(guò)程保持安靜，勿晃動(dòng)儀器，不然成像易模糊。
圖像優(yōu)化：倘若初次采集的圖像不夠理想，例如背景過(guò)亮、蛋白條帶不清晰，利用軟件自帶的對(duì)比度、亮度調(diào)節(jié)工具微調(diào)，凸顯目標(biāo)條帶。
分析數(shù)據(jù)：運(yùn)用軟件的定量分析功能，框選目標(biāo)蛋白條帶，測(cè)量其灰度值、面積等數(shù)據(jù)，以此來(lái)對(duì)比不同樣本間蛋白表達(dá)量的差異，為實(shí)驗(yàn)結(jié)論筑牢數(shù)據(jù)根基。

實(shí)驗(yàn)收尾
關(guān)閉軟件：完成圖像采集與分析，先安全關(guān)閉操作軟件，避免數(shù)據(jù)丟失或軟件出錯(cuò)。
關(guān)閉儀器：關(guān)掉成像儀電源開(kāi)關(guān)，拔下插頭。清理暗箱，擦拭平臺(tái)，為下次實(shí)驗(yàn)營(yíng)造良好開(kāi)端。

只要遵循上述步驟，就能順利駕馭 WB 化學(xué)發(fā)光成像儀，助力科研探索。

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